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单细胞测序服务

　　武汉国家级人类遗传资源库是国内较早从事单细胞测序技术研发与服务的单位之一，在2021年4月成为10x Genomics官方认证的华中区唯一的单细胞测序共建实验室。目前平台已成功开展人、小鼠、牛、鱼类和小麦等多物种多组织上千例样本的单细胞测序以及人和小鼠不同组织的空间转录组测序，拥有丰富的项目经验和专业的技术人才。目前，平台已支撑多位客户发表高水平文章。

单细胞测序

空间转录组测序

单细胞多组学ATAC+基因表达

该技术将ATAC与转录组测序结合起来通过表观基因组和基因表达谱的综合分析来鉴定复杂的细胞群体，并发现细胞异质性，从而发现隐藏的信息。将调控元件的发现与基因表达相结合，探索驱动细胞分化、发育和疾病的基因调控相互作用。

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单细胞ATAC测序

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单细胞免疫组库测序

10x Genomics单细胞免疫组库(V(D)J)测序，基于微流体平台，特异性提取富集TCR/BCR区域，通过比对、拼接、筛选、注释等对单个细胞进行免疫组库构建，分析得到TCR/BCR多样性序列，从而以高通量、高分辨率获得细胞群体的免疫特征。

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单细胞转录组测序

单细胞转录组测序(Single-cell RNA-sequencing, scRNA-seq)是在单个细胞水平对 mRNA 进行高通量测序的一项新技术，其原理是将多细胞生物分离的单个细胞中微量的转录组 mRNA 通过高效扩增后再进行高通量测序。单细胞转录组测序能够有效解决组织样本无法破解的细胞异质性难题以及常规RNA-seq被掩盖的细胞群内的转录组异质性难题，有助于发现新的稀有细胞类型，并深入了解发育过程中的表达调控机制。

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FFPE样本空间转录组测序

Visium FFPE空间基因表达是基于探针杂交的原理，从FFPE组织样本中获得组织的空间基因表达图谱，在形态学背景下实现真正的原位检测。该技术首先将FFPE组织切片置于Visium基因芯片上进行组织形态学染色和成像，然后利用Visium基因芯片上的探针进行定量表达。由于FFPE样本通常存在RNA高度降解的问题，针对FFPE样本的Visium空间基因表达解决方案无法像新鲜冰冻组织样本一样利用完整mRNA具有的poly(dA)序列进行mRNA捕获。该方案采用针对编码基因的成对RNA模板连接探针(RTL)与mRNA杂交，左侧探针(LHS)具有部分Read 2序列，右侧探针(RHS)具有合成的poly(A)序列，左右探针与mRNA杂交后彼此连接，而mRNA被RNase降解。通过组织透化，被连接的成对探针与芯片上包含Barcode、UMI和poly(dT)序列的引物序列捕获，然后携带空间Barcode的探针序列用于文库构建和测序，从而获得基因表达信息及空间位置信息。

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新鲜冰冻组织空间转录组测序

当冰冻组织切片放置在带有spatial barcode的Visium 芯片的捕获区域内，进行HE染色和成像后，通过组织透化，细胞内的mRNA释放，被芯片上带有oligo-dT的探针捕获。被捕获的mRNA开始逆转录，得到的cDNA中包含spatial barcode序列，构建文库后通过测序，可以将mRNA转录的序列映射到组织中的原始位置，从而获得基因表达的位置信息。

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高通量测序服务

　　武汉国家级人类遗传资源库从样品处理到信息分析，承诺细致的服务周期和周到的售后体验，严格完善的生产管理和服务体系与大批技术团队共同为医学、农业等多学科领域科研专家提供更优质的服务和测序方案。

宏基因组测序，是对特定环境样品中的微生物群落基因组进行高通量测序，以分析微生物群体基因组成及功能，解读微生物群体的多样性与丰度，探求微生物与环境、微生物与宿主之间的关系，发掘和研究新的、具有特定功能的基因。而所谓宏基因组学就是一种以环境样品中的微生物群体基因组为研究对象以功能基因筛选和/或测序分析为研究手段, 以微生物多样性、种群结构、进化关系、功能活性、相互协作关系及与环境之间的关系为研究目的的新的微生物研究方法，解读微生物群体多样性与丰度，探求微生物与环境，微生物与宿主之间的关系，发掘和研究新的、具有特定功能的基因。

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全基因组测序

全基因组测序(Whole Genome Sequencing，WGS)，是对全基因组进行测序扫描，能在全基因组范围内解读所有常见和稀有变异信息，进行单核苷酸多态位点(Single Nucleotide Polymorphisms, SNP)、插入缺失位点(Insertion Deletion, InDel)、结构变异(Structure Variation，SV)以及拷贝数变异(Copy Number Variation, CNV)深度挖掘，进而全面揭示基因组突变类型与染色体重排事件，对疾病机理研究、药物靶点筛选等具有指导意义。应用范围涉及临床医药研究、群体遗传学研究、关联分析、进化分析等众多领域。

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外显子组测序

全外显子组测序(Whole Exome Sequencing，WES)是指利用序列捕获技术将外显子区域DNA进行捕获并富集后进行高通量测序，能够直接发现与蛋白质功能变异相关的遗传变异，虽然外显子区域不到全基因组的2%，但是却集中了大部分疾病的致病突变位点。目前，外显子组测序技术已经应用到寻找与各种复杂疾病相关的致病基因和易感基因的研究中。

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宏转录组测序

宏转录组学是一门在整体水平上研究某一特定环境、特定时期群体生物全基因组转录情况以及转录调控规律的学科。宏转录组测序，可原位研究特定生境特定时空下微生物群落中活跃菌种的组成以及活性基因的表达情况。结合理化因素的检测，宏转录组可研究多样本间由于理化等指标的差异，时空上不同微生物群落间活跃成分组成的差异分析。

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长链非编码RNA测序

lncRNA是一类长度大于200bp，不编码蛋白的RNA，广泛存在于生物体内。lncRNA在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达水平，在生命活动中具有重要作用。lncRNA测序是一种使用特定方法降低样本中rRNA的丰度，对富集到的RNA进行文库构建测序，再对数据进行信息分析的研究方法。

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转录组测序

转录组测序分析的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有mRNA的总和。转录组研究是基因功能及结构研究的基础和出发点，通过新一代高通量测序技术，能够全面快速地获得某一物种特定组织或器官在某一状态下的几乎所有转录本序列信息。转录组测序广泛应用于动植物基础研究、医学临床诊断和药物研发等领域。

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甲基化测序

基因组甲基化测序(Bisulfate Sequencing, BS-seq)是指利用重亚硫酸盐对全基因组DNA 进行处理，可使未甲基化修饰的胞嘧啶碱基转化为尿嘧啶碱基，然后利用高通量测序在全基因组范围内检测所有的甲基化位点，绘制单碱基分辨率的DNA 甲基化图谱。通过全基因组甲基化测序可以全面了解胚胎发育、衰老、疾病过程中表观遗传差异的作用机理，为相关研究提供指导。

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细胞免疫分析服务

细胞免疫分析服务主要包含两大功能板块：可在病理组织层面开展7色以上的空间表型分析，在细胞水平完成20色以上的细胞表型分析。已建立多种成熟技术方案，完美衔接高通量流式分选、单细胞测序、SMART-seq2等环节。

分析样本数量超过百万，在肿瘤发生发展、新型疫苗研发与评价，感染与炎症等领域的微环境研究与免疫功能评估等方面积累了丰富经验。为客户提供项目方案设计、样本处理到检测分析的一站式服务。

随着免疫学研究的发展，检测的免疫指标研究更深入更多元。基于流式细胞术的多指标高通量检测特点，可同时检测多个指标如T/B/NK、单核、巨噬、Th1/Th2/Th17等，进行免疫细胞的分型及胞内因子表达的功能评估。

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多重细胞因子表达评估

细胞因子作为细胞间信号传导的分子，主要介导和调节免疫应答及炎症反应，通过调节免疫促进与免疫抑制的动态平衡，维持机体免疫系统的稳定。检测细胞因子对于某些疾病的诊断、治疗具有重要价值。胞外（血清、细胞培养液、灌洗液等）细胞因子反映分泌水平。

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高通量细胞分选

流式分选在流式分析的基础上，能将感兴趣的目标细胞“挑拣”出来，作为后续培养扩增、蛋白鉴定、测序等实验操作的素材。对于分选的挑战，除了需要快速准确分选外，还要使获得的细胞具有高活力、高纯度、高回收率。

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流式特色服务

流式特色服务项目包括：胞外囊泡的鉴定（流式+单细胞测序）、肿瘤免疫微环境的研究（流式+单细胞测序+多重免疫荧光）、植物基因组大小检测（流式+测序）。

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定制化多重免疫荧光panel

多重免疫荧光技术是一项基于酪胺信号放大（TSA）的免疫染色技术，能够在一张组织样本上复染多种分子标记。武汉生物样本库可以根据具体项目，进行抗体选择和组合，通过标准化制片和高通量组织切片全景定量分析系统，提供多靶点组织原位染色分析技术服务，快速实现多达9色复染的定量病理分析结果。借助着色后抗体洗脱技术、光谱信号识别技术，AI智能定量病理学分析软件，对图像中的组织、细胞、蛋白进行定性、定形、定量分析，最后以可视化图表的形式直观展示数据结果。

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即用型多重免疫荧光panel

围绕肿瘤研究的临床转化项目，开发基于免疫细胞、肿瘤细胞及免疫检查点的即用型panel。更多的即用型panel正在开发中…

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多色病理数据分析

利用光谱信号识别技术，将重叠的多色信号准确的拆分开来，配合inForm智能定量病理学分析软件及专业生信分析团队，对图像中的组织、细胞、蛋白进行定性、定形、定量分析，最后以可视化图表的形式直观展示数据结果，为客户提供标准化和定制化数据分析，满足不同类型的需求。

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原代细胞/3D类器官培养（建设中）

基于临床来源的组织样本，正在进行不同癌及癌旁组织原代细胞/3D类器官标准培养及鉴定体系搭建。目前已有部分癌种的标准体系即将搭建完成，可提供原代细胞分离、培养、鉴定等相关检测。

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蛋白质组学检测服务

武汉国家级人类遗传资源库拥有两大蛋白组学技术平台，一个是基于Olink邻位延伸技术(PEA)的超微量精准蛋白组学技术平台，该技术聚焦于靶向蛋白检测，可以兼顾高通量、高特异性、高灵敏度和宽动态范围，主要适用于人和小鼠；另一个是基于质谱（LC-MS）的无偏倚蛋白组学技术平台，没有种属限制，除了常规的鉴定和定量外，还可以助力蛋白互作和翻译后修饰研究。

Olink蛋白质组学服务

LC/MS蛋白质组学服务

Olink精准蛋白质组学分析服务

Olink蛋白检测平台基于邻位延伸技术Proximity Extension Assay (PEA)对蛋白进行检测，该技术针对每个待检蛋白，都会在其相邻的两个抗原表位设计一对抗体，抗体上偶联有特定的DNA单链，单链末端含有配对碱基，当这对抗体与目标蛋白结合后，处于邻位的两条DNA单链经过杂交互补并在酶促反应下延伸形成双链模板，利用微流控qPCR或NGS对双链模板进行检测，从而可以实现对蛋白的定量分析，该技术巧妙地将蛋白质定量转换为DNA定量，解决了蛋白质不能扩增的问题，因此可以实现对微量蛋白的检测。

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蛋白质定性分析服务

蛋白质全谱分析也可称为质谱shotgun分析，指的是组分分析，研究对象是完整的组织、体液或其提取物，其目的在于鉴定出尽可能多的肽和蛋白质分子。蛋白质质谱鉴定的基本原理是用蛋白酶将蛋白质消化成肽段混合物，用电子轰击或者其他方式使其离子化，形成不同质荷比的带电离子，然后通过质量分析器将具有特定质核比的肽段离子分离开来。通过实际谱图和理论上蛋白质经过蛋白酶消化后产生的一级质谱峰图和二级质谱峰图进行的比对，从而进行蛋白鉴定。

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蛋白质定量分析服务

TMT™(Tandem Mass Tag™)技术是由美国Thermo Scientific公司研发的一种多肽体外标记技术，该试剂是专为通过串联质谱(MS)对不同样品中的蛋白质进行鉴定和定量而设计。本技术采用多种同位素的标签，标记多肽的氨基基团，经过LC-MS/MS分析，可同时比较2-16组不同样品中蛋白质的相对含量。