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免疫细胞分型及功能评估

免疫细胞分型及功能评估

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Q&A

流式细胞术(FCM)是以激光为光源,对处在快速、直线、稳定流动状态的细胞或颗粒进行多参数、快速定量分析和分选的技术。除应用于常规凋亡、周期外,还可应用于免疫细胞分型、胞内/胞外细胞因子、磷酸化蛋白的检测、干细胞表型鉴定、植物倍性/基因组大小评估、高通量单细胞分选进行下游测序等。

 

随着免疫学研究的发展,检测的免疫指标研究更深入更多元。基于流式细胞术的多指标高通量检测特点,可同时检测多个指标如T/B/NK、单核、巨噬、Th1/Th2/Th17等,进行免疫细胞的分型及胞内因子表达的功能评估。

 

 

使用仪器:Cytoflex S(4激光13色)、Cytoflex LX(6激光21色)

应用领域:免疫学、血液学、肿瘤学、骨髓和器官移植、抗肿瘤药物研究、疫苗研究、基础医学研究等

项目优势:

高配置流式分析/分选仪,临床/科研取样后直达实验室,完成组织解离、流式分析/分选后可对接本公司测序、单细胞测序、蛋白组学、生信分析等平台一站式服务,没有中间商赚差价;

专业技术人员具有数十年流式及细胞实验经验,提供专业技术指导;协助的样本分析数量超十万例,并积累了丰富的科研项目开发经验,针对性提供高质量的定制服务。

 

项目周期:

项目类型

项目内容

服务周期

细胞原材料获取

全血PBMC分离

1-3个工作日

组织单细胞悬液制备

1-3个工作日

免疫细胞分型

T/B/NK

1-3个工作日

单核、巨噬、粒、DC、MDSC等

1-3个工作日

免疫细胞分化及活化比例改变

Treg/Th1/Th2/Th9/Th17/Th22/记忆T/Tfh/记忆B、GC B/巨噬M1/M2等

1-3个工作日

胞内因子表达的功能评估

Th1/Th2/Th9/Th17/Th22等胞内因子

3-5个工作日

备注:以上周期为甲方提供试剂,若乙方现有试剂已使用完毕,需含采购周期4-5周

署名文章: Preclinical immunogenicity assessment of a cell-based inactivated whole-virion H5N1 influenza vaccine.

发表期刊:Open Life Sciences

样本类型:小鼠脾脏

应用技术:流式细胞术

文章概述:本文采用免疫细胞分型、细胞因子表达定量和免疫球蛋白G(IgG)亚型分类等方法研究疫苗诱导的免疫反应。采用攻毒试验的方法评价了该疫苗对小鼠的保护作用。大鼠抗H5N1抗体在第一次注射后持续8个月。与安慰剂组相比,接种小鼠的血清滴度显著升高,Th1和Th2细胞被激活,两组CD8+ T细胞被激活。此外,攻毒试验显示,接种疫苗降低了攻毒后小鼠肺部的临床症状和病毒滴度,表明其具有优越的免疫反应。值得注意的是,在接种疫苗后的早期,发现干扰素诱导蛋白-10(IP-10)水平显著增加,表明疫苗诱导的先天免疫得到了改善。

 

 

活化CD4/CD8T细胞的检测

(1)Th1/Th2免疫细胞分型     

小鼠脾脏中Th1/Th2分型及比例

 

(2)淋系/髓系免疫细胞分型

小鼠皮下瘤淋系T/髓系(巨噬/MDSC)部分图

样本类型

样本要求

注意事项

细胞

培养中的细胞

培养瓶内加满细胞培养液,拧紧瓶盖,封口膜封口

市内运送请保持4℃(若是冰袋,需做好物理隔离,避免冻住),2小时内送至我方实验室;若寄送样本,只能是冻存细胞,干冰运输

细胞悬液

对数生长期的贴壁细胞经胰酶消化成(或悬浮细胞不经胰酶)单细胞悬液、PBS洗涤后,进行活细胞计数,活力>80%,调整细胞浓度为(5-10)×105细胞/mL

冻存细胞

细胞浓度为(5-10)×105细胞/mL,活力>80%

干冰寄送

血液

全血

抗凝全血(体积需根据具体检测项目类型进行沟通),确认血液无凝血、无溶血

1.若需检测胞内细胞因子,抗凝血建议使用肝素抗凝管,避免使用EDTA抗凝管;

2.血样的运送过程中,避免剧烈碰撞,避免温度急升急降,保持在4℃环境(若是冰袋,需做好物理隔离避免血样冻住),24h内送至我方实验室;

3.若无法立即检测,需冻存不能直接全血冻,需分离PBMC后再冻存;冻存样本需干冰运输。

PBMC

裂红液裂红或者淋巴分离液分离获得PBMC,冻存

组织样(脾、淋巴结、肺、皮下瘤等)

新鲜组织不小于0.5cm ×0.5cm ×0.5cm,剔除坏死组织并清洗干净血液;组织保存液保存,保持在4℃环境(若是冰袋,需做好物理隔离避免组织冻住),24h内送至我方实验室

1.新鲜组织样就地取材,1h内尽快使用保存液进行保存;

2.若样本48h内无法进行检测,需冻存,不能直接冻组织,需自行处理成单细胞悬液后,冻存,干冰运输

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